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Serpieri a étudié la peinture et l'architecture à l'Institut des arts de Rome où il est l'élève de Renato Guttuso. Il débute en tant que peintre en 1966, avant de se tourner vers la bande dessinée en 1975. Grand amateur de westerns, Serpieri coécrit L'Histoire du Far-West, série sur le Far-West, avec le scénariste Raffaele Ambrosio, et publiée aux éditions Larousse.

À partir de 1980, il travaille sur des courtes histoires pour des magazines comme L'Eternauta, Il Fumetto et Orient-Express.

En 1985, il crée la série « Druuna », qui comprend 8 volumes publiés entre 1985 et 2003.

Ses œuvres ont connu un très grand succès puisqu'il a vendu plus d'un million d'albums traduits en 20 langues.
Il a également travaillé sur le design du jeu vidéo Druuna : Morbus Gravis, basé sur le personnage de sa plantureuse héroïne.

Avant Druuna, Serpieri, grand amateur de l'Ouest américain, avait dessiné de nombreuses histoires d'indiens, nous publions ces récits dont la plus part sont inédits en France.